液相色谱仪荧光检测器原理及应用范围

液相色谱仪的荧光检测器是双光路固定波长荧光检测器的中压泵灯发出的连续光经过半反射半透镜被分成两束，再分别通过测量池和参比池。半反射半透镜将百分之十左右的激发光反射在参比池及相应的光电倍增管上。液相色谱仪参比池有利于消除流动相所发射的本底荧光以及外界的影响，参比光路也有利于消除光源波动的影响。百分之九十左右的激发光经过激发光滤光片分光后选择定波长的光线作为样品激发光。该光束经过第一透镜聚光在样品池内的组分受激后发出的荧光强度与样品浓度成正比，这就是荧光检测器定量的基础。为避免激发光的干扰而选取与激发光成直角方向的荧光，由第二透镜将其会聚到发射滤光片后再通过光电倍增管以及放大器至记录仪。

液相色谱仪荧光检测器的灵敏度要比紫外检测器要高一百倍，当要对痕量组分进行选择性检测时其是一种强有力的检测工具。但它的线性范围较窄不宜作为一般的液相色谱仪检测器来使用但可用于梯度洗脱。它测定中不能使用可熄灭抑制或吸收荧光的溶济作流动相。对不能直接产生荧光的物质要使用色谱柱后衍生技术但其操作比较复杂。

荧光检测器现已在临床医学检验、生物化工、环境监测、食品检验中获得广泛的应用。