本方法适用于饮料、代用茶等食品及片剂、胶囊、颗粒剂、口服液等剂型的保健食品中大黄酚和橙黄决明素的含量测定。
一、原理
试样经甲醇回流提取后，再以稀盐酸水解，二氯甲烷萃取，采用配有二极管阵列检测器或紫外检测器的高效液相色谱仪检测，外标法定量。
二、试剂配制
1、磷酸水溶液 ( 0.1% )：取磷酸 ( 3.1.3 ) 1.0mL，加水定容至1000mL。
2、稀盐酸：取盐酸 ( 3.1.5 ) 234mL，用水溶解并定容至1000mL。
3、无水乙醇-乙酸乙酯 ( 2+1 ) 混合溶液：取无水乙醇500mL与乙酸乙酯250mL，混匀。
4、甲酸水溶液 ( 0.1% )：取甲酸 ( 3.1.8 ) 1.0mL，加水稀释并定容至1000mL。
三、仪器和设备
1、高效液相色谱仪：润扬仪器LC-3000U型，配有二极管阵列检测器或紫外检测器。
2、超声波清洗器。
3、高速多功能粉碎机。
4、分析天平：感量分别为0.01g和0.01mg。
5、电热恒温水浴锅。
6、旋转蒸发仪。
7、氮吹仪。
四、固态试样或半固态试样
取适量固态试样 ( 代用茶及片剂、胶囊内容物、颗粒剂等保健食品 ) 混匀，研细，或取适量半固态试样 ( 软胶囊内容物 ) 混匀，称取0.5g～1g (准确至0.001g )，置平底烧瓶中，加入甲醇50mL，混匀，称定重量，加热回流1h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密吸取续滤液25mL于平底烧瓶中，蒸干 ( 或氮吹至干 ) ，加入稀盐酸 ( 3.2.2 ) 30mL，超声2min，加热回流水解1h，立即冷却，置于分液漏斗中，先用少量水洗涤烧瓶，再用少量二氯甲烷洗涤烧瓶，并入分液漏斗中，酸液再用二氯甲烷振摇提取4次，用量依次为40mL、30mL、30mL、20mL，合并二氯甲烷液，减压回收溶剂至干，残渣用无水乙醇-乙酸乙酯 ( 2:1 ) 混合溶液 ( 3.2.3 ) 溶解，转移至25mL容量瓶中，定容至刻度，溶液经0.45µm有机系微孔滤膜滤过，取续滤液，根据实际浓度适当稀释至标准曲线线性范围内，备用。
五、标准曲线的制作
将标准系列工作液 ( 3.4.3 ) 按液相色谱仪参考条件 ( 5.2 ) 进行测定，测定相应的色谱峰面积，以标准工作液的浓度 ( μg/mL ) 为横坐标，以色谱峰的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。
六、试样溶液的测定
将试样溶液 ( 5.1 ) 按液相色谱参考条件 ( 5.2 ) 进行测定，得到相应样品溶液的色谱峰面积。根据标准曲线得到待测液中组分的浓度，平行测定次数不少于两次。
