多环芳烃（PAHs）是指含两个或两个以上苯环的芳烃。PAHs由于具有毒性、遗传毒性、突变性和致癌性， 对人体可造成多种危害，被认定为影响人类健康的主要有机污染物。HJ 478、HJ 647、HJ 784规定了PAHs的液相紫外和液相荧光分析方法，由于同时分析16种或15种PAHs，在检测器方法设置上规定了可以使用多波长检测，此文中我们将其称之为紫外梯度检测或荧光梯度检测，对检测器进行梯度设置的目的是，在各个PAHs蕞佳紫外吸收波长或蕞佳激发波长和发射波长下检测对应的目标化合物，使其响应强度蕞高，降低方法的检出限，因而梯度检测比单波长检测具有更高的优势。
在梯度检测中，对液相色谱仪不是很熟悉的小伙伴们往往会受到色谱峰异常的困扰，接下来我们以荧光梯度法检测15种PAHs为例帮大家分析色谱峰异常的原因及其解决方案。
比如以下4张色谱图，可以看到有些色谱峰只出了一部分，就被打断，同时基线发生变化，有时抬高，有时降低，已经影响到定性和定量分析。
而正常的色谱图应该是这样的：基线平稳，色谱峰对称性好，各峰可以达到基线分离。
出峰顺序依次为：萘、苊、芴、菲、蒽、荧蒽、芘、苯并(a)蒽、屈、苯并(b)荧蒽、苯并(k)荧蒽、苯并(a)芘、二苯并(a,h)蒽、苯并(g,h,i)、茚并(1,2,3-cd) 芘。
此图对应的色谱条件为：
色谱柱：CNW Athena PAHs（4.6mm×250mm, 5um）
流动相：
流速：2.0mL/min
柱温：30℃
进样量：10μL
检测器：FLD
色谱峰异常的原因：
由于每次分析的时候，分析条件，比如仪器状态、流动相组成、环境温度等都会有细微的变化，各个PAHs的保留时间并不是一成不变的，会有微小的波动，且同时分析15种PAHs，即使各个PAHs能达到基线分离，但保留时间差异不是特别大，而荧光梯度波长转换时间如果还完全采用上次分析条件或完全按照参考资料的分析条件进行，可能在色谱峰尚未完全出峰完毕的时候波长就发生转换，影响到该色谱峰的记录，从而出现不完整、不对称的峰形。
色谱峰异常的解决方案：
（1）尝试调节流动相的洗脱条件，尽可能提高化合物之间的分离度；
（2）荧光梯度条件的设置要同时考虑实验目的，在满足定量限的要求时，减少荧光梯度切换的频率；
（3）因分析的目标化合物数量较多，为了得到较好的分离度，并避免保留时间漂移，应避免温度波动太大：
流动相配制后要在液相分析室放置一段时间使其与室温一致后再使用，分析测试过程中要控制室温和色谱柱温度，
（4）荧光梯度切换的时间每次实验都要进行微调，以保证各个色谱峰不在波长转换的时间点出峰，从而得到对称的色谱峰。调整原则：先按照蕞近一次PAHs正常分析的荧光梯度时间进行样品测试，待仪器平衡后，一般连续进样2针后，色谱峰的保留时间就不再发生大的波动，通过计数荧光梯度各个时间段内色谱峰的数量，设置合理的切换时间，使切换时间点在上一个峰刚好出完和下一个峰刚好出现的时间中点。
（5）紫外梯度检测与荧光梯度检测类似，采用类似的解决方法避免色谱峰在波长切换的时候出峰。
