人参皂苷属于三萜类皂苷化合物，易溶于甲醇、乙醇，且含有糖链数量多的人参皂苷水溶性优于含有糖链数量少的人参皂苷或苷元。混合的人参皂苷随流动相进入色谱柱，含有糖链结构较少的人参皂苷先流出色谱柱，此外随着流动相中有机相所占比例的增加，人参皂苷的保留时间会变短，但是结构相似的人参皂苷分离度降低。因此，需要适合的梯度洗脱程序才能实现不同人参皂苷在较短的时间内的分离。
仪器设备与测试条件
人参皂苷属于三萜类皂苷化合物，易溶于甲醇、乙醇，且含有糖链数量多的人参皂苷水溶性优于含有糖链数量少的人参皂苷或苷元。混合的人参皂苷随流动相进入色谱柱，含有糖链结构较少的人参皂苷先流出色谱柱，此外随着流动相中有机相所占比例的增加，人参皂苷的保留时间会变短，但是结构相似的人参皂苷分离度降低。因此，需要适合的梯度洗脱程序才能实现不同人参皂苷在较短的时间内的分离。
仪器配置
润扬LC-3000U型高效液相色谱仪；自动进样器；
试剂耗材
人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd、Rf、Rc、Rb2和Rb3；磷酸；甲醇；乙腈；超纯水。
测试条件
C18色谱柱柱温：25℃±1℃
进样量：20μL
流动相：乙腈(A)—0.1%磷酸水溶液(B)
流速：1mL/min
梯度洗脱程序：
3 测试结果
色谱分离
8种人参皂苷的色谱分离图
线性关系
8种人参皂苷的线性关系考察结果
精密度
精密度测试曲线
4 结论
本方案使用LC-3000U液相色谱仪，在25℃±1℃柱温条件下，以乙腈—0.1%磷酸水溶液为流动相，按一定的梯度洗脱程序，实现了对8种人参皂苷的分离分析测定。标准溶液的校正曲线线性良好，相关系数r均大于0.999；8种人参皂苷混合标样重复6次进样的峰面积RSD＜1.0%；空白加标回收试验的回收率均在96.08%~107.59%，RSD≤4.59%，该方法具有良好的稳定性和准确度。
与2020版中国药典和《GB/T 22996-2008 人参中多种人参皂苷的测定 液相色谱-紫外检测器》中对人参总皂苷的检测方法相比，该方案增加了可同时检测的人参皂苷的种类；与目前文献中人参皂苷检测方法相比，本方案能够达到更低的定量限，为市场上人参皂苷产品质量控制提供了更高效准确的解决方案。
