液相色谱仪分析样品前处理固相萃取常见的问题及解决方法

液相色谱仪分析样品前处理固相萃取常见的问题及解决方法

日期:2021-12-27

固相萃取 ( Solid Phase Extraction,简称SPE ) 是从八十年代中期开始发展起来的一项利用固体吸附剂对样品中不同组分的选择性吸附能力差异来分离、纯化样品的前处理方法。固相萃取技术是食品检测中蕞常用到的技术手段,下面列举了一些在液相色谱仪分析样品前处理固相萃取中常见的问题及解决方法。

● 目标化合物回收率偏低(目标化合物没有或部分被吸附在SPE柱上)

原因1:SPE柱的极性不合适

解决方法:选择对目标化合物有明显选择性的SPE柱。

原因2:当大体积水样品通过SPE柱时,反相柱填料失去柱子预处理留下的甲醇

解决方法:在样品溶液中加入1%-2%的甲醇或异丙醇或乙腈。

目标化合物回收率偏低(目标化合物没有被洗脱出SPE柱)

原因1:SPE柱的极性不合适

解决方法:选择其他低极性或者选择性弱的SPE柱。

原因2:洗脱溶剂不够强,无法将目标物化合物从SPE柱上洗脱

解决方法:改变洗脱溶剂的pH以增加其对目标化合物的亲和力。

原因3:洗脱溶剂体积太小

解决方法:增加溶剂体积。

原因4:在添加样品之前SPE柱已干燥

解决方法:重新进行SPE预处理。

原因5:样品过柱流速太快

解决方法:降低流速。

原因6:目标化合物在样品中的溶解度太大,样品过柱时与样品同时通过柱子而没有被保留

解决方法:通过改变样品极性或pH而改变目标化合物的溶解度。

原因7:洗涤杂质用的溶剂太强,部分目标化合物与杂质同时被从SPE柱洗脱。目标化合物在这一步损失的多少取决于洗涤溶剂的流速,SPE的特性以及洗涤溶剂的体积。

解决方法:降低洗涤溶剂的强度。

在用反相SPE柱萃取时,洗脱馏分中有水

原因1:干扰物来自SPE柱

解决方法1:用两根不同极性的SPE柱以除去干扰物。如反相柱和离子交换柱或硅胶柱。

解决方法2:在柱子预处理之前用洗脱溶剂洗涤SPE柱。

用反相柱从固态样品中萃取非极性目标化合物

原因:目标化合物不在液体溶液中

解决方法:用甲醇、异丙醇或乙醇对样品进行均浆处理。然后离心过滤,再用水将清液稀释为含水量70%-90%的水溶液。

原因:目标化合物不在液体溶液中

解决方法:用非极性溶剂(如正己烷、石油醚、氯仿等)均浆。

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