近年来随着高效液相色谱仪的检测器灵敏度和色谱柱峰容量的提高，可以在极低浓度下进行检测，但鬼峰问题却成为了人们关注的焦点。今天就跟大家聊聊液相色谱仪分析中鬼峰产生原因和解决措施吧!
一、什么是鬼峰？
如果化合物出现的时间少于预期的保留时间,则称为鬼峰”。这将显示为与注入同一色谱图的化合物具有不同保留时间的峰。色谱中的鬼峰是在小于预期保留时间的间隔内出现的不需要的峰。这些峰通常是由其他化合物或代谢物与溶剂和固定相的相互作用引|起的,这会导致分离度降低，使评估分离质量变得困难。
二、鬼峰的来源？
鬼峰的来源通常分为三类：目标物质以外的杂质、LC仪器的内部污染和流动相中的杂质。
(1) 仪器中的杂质
仪器中产生鬼峰的蕞常见原因是进样器造成的残留。当将针头浸入小瓶中吸取样品时，样品中的物质会成为残留物的来源，因为它们可以吸附到针头的内外表面。那些即使在针头冲洗后也没有被去除的物质被带到下一个分析中，并以鬼峰的形式出现。由于即使在多次空白分析（仅注入流动相的分析）后也会出现表现出特别强吸附的物质，因此可能很难将自动进样器识别为鬼峰的来源。
(2) 样品中的杂质
当样品中存在与目标化合物吸收波长相同的杂质时，就会产生鬼峰。由于来自样品的鬼峰不会出现在空白注射中，因此确定来源相对容易。
(3) 流动相中的杂质
①流动相中因长时间使用而产生有机物或空气中的有机物溶解在流动相中
②由于长期用新流动相补足现有流动相而不是每天或为每组样品准备新瓶而导致流动相被污染
③使用受污染的有机溶剂和/或水制备流动相
④使用受污染的流动相试剂
三、出现“鬼峰”怎么办？
如果早期峰是由于样品引起的，那么它实际上不是鬼峰，而是分析中需要考虑的真实样品峰。光散射是表征这些大聚集峰的一个很好的工具，因为即使没有可用于确定摩尔质量的浓度信号，仍然可以确定大小（RMS 半径）和数密度。如果样品中大颗粒的峰渗入其他样品峰，您可以调整目标样品峰的基线以排除较大颗粒的贡献。如果空白注入也能看到鬼峰，那是真正的鬼峰了。
要消除或防止这些鬼峰：在加载和注入步骤中使用压力变化蕞小的 HPLC 系统。请注意，加载期间的压力仅显示在前面板上，通常不是 HPLC 数据文件中记录的数据的一部分。如果鬼峰或系统峰在多次空白注射中可重现，您可以使用 ASTRA 的基线减法程序从样品注射中减去空白注射的光散射基线。选择脱落蕞少的液相色谱柱。逐渐改变流速（不超过 0.1 mL/min2）以防止大的压力变化冲击色谱柱。
鬼峰捕集去除柱（又称鬼峰捕集小柱）可以有效吸附流动相中的杂质，从而缩短了方法验证和杂质分析的时间。鬼峰捕集去除柱主要的特点是能够去除溶剂包括有机溶剂中的杂质。反相色谱梯度分析时，将鬼峰捕集小柱安装在梯度混合器和自动进样器之间，不仅能够去除流动相中的杂质，还可以有效捕集管路和混合器中的杂质。
