维生素B6是一组相关的杂环化合物,包括三种性质相近,具有维生素B6活性的吡哆醇、吡哆醛和吡哆胺。维生素B6是机体内许多重要酶系统的辅酶,参与氨基酸的脱羧作用、色氨酸的合成、含硫氨基酸的代谢和不饱和脂肪酸的代谢等生理过程,是人体正常发育必需的营养成分。一般而言,人与动物的肠道中微生物可合成维生素B6,但其量甚微,还是要从食物中补充。维生素B6的需要量与蛋白质的代谢量成正比,婴儿建议摄食量为0.3-0.6mg,一至十岁的孩童为0.9-1.6mg,对于青少年而言,建议摄食量为1.8-2.0mg。
目前国家规定的婴幼儿配方食品和乳品中维生素B6的测定方法是高效液相色谱仪分析法。
实验部分
仪器配置
润扬仪器LC-3000U型高效液相色谱仪
P3000U高压泵,自动进样器,柱温箱,UV3000U荧光检测器
标准品
维生素B6
表1. 色谱分析条件
图1.标准品色谱结果
( 吡哆醛-0.1mg/L; 吡哆醇-0.2mg/L; 吡哆胺-0.1mg/L )
结果与讨论
表2.标准品重现性结果(n=6)
从实验结果可以看出,吡哆醛的保留时间和峰面积RSD分别是0.04%和0.26%,吡哆醇的保留时间和峰面积RSD分别是0.03%和0.38%,吡哆胺的保留时间和峰面积RSD分别是0.08%和0.31%,均获得了良好的重现性。
图2. 标准曲线结果
吡哆醛和吡哆胺在0.01 – 0.8 mg/L, 吡哆醇在0.02 – 1.6 mg/L的浓度范围内线性关系均达到0.999以上,线性良好。
图3.实际样品前处理过程
图4. 实际样品分析结果
对市售的米粉和奶粉按图3处理后进行维生素B6的测定。从图4检测结果可以看到,每100g样品中维生素B6分别是1046μg和780μg。对米粉样品和奶粉样品进行加标回收率实验,米粉中吡哆醛、吡哆醇、吡哆胺的加标回收率分别为114.15%、95.30%、100.91%;奶粉中相应三种物质的加标回收率分别为115.84%、88.06%、98.20%。
结论
本实验所用方法可用于检测婴幼儿食品和乳品中的维生素B6,标准曲线线性和重现性良好。可用于生产企业、质检等部门对维生素B6的检测。